1-10
基因干擾慢病毒是一種特殊的病毒載體，用于實現基因干擾(RNA干擾，RNAi)技術。慢病毒：慢病毒是一種有包膜的RNA病毒，直徑為80~120nm，呈二十面體對稱結構、球形。它屬于逆轉錄病毒的一種，但具有更廣的宿主范圍，對分裂細胞和非分裂細胞...
12-10
過表達慢病毒是一種基于慢病毒載體的基因傳遞系統。慢病毒是一類單鏈RNA病毒，其基因組可以整合到宿主細胞的染色體上，從而實現長期穩定的基因表達。通過將目的基因克隆到慢病毒載體中，利用慢病毒的包裝質粒和輔助質粒共同轉染到包裝細胞中，經過包裝、成...
11-11
慢病毒包裝試劑盒通常包含優化的慢病毒包裝輔助質粒混合物、表達特定標記蛋白(如eGFP)的對照質粒以及高效轉染試劑。這些組件共同協作，能夠表達出病毒包裝所需的各種必需成分，如gag基因(編碼病毒主要的結構蛋白)、pol基因(編碼病毒特異性的酶...
10-21
蛋白轉染是一種將外源蛋白質導入細胞的技術，廣泛應用于生物學研究和基因治療領域。1.定義：將外源蛋白質或其編碼的DNA序列導入到宿主細胞中，使該細胞能夠表達和產生相應的蛋白質。2.方法：常見的方法包括化學法、電穿孔法、脂質體介導法和病毒載體法...
9-12
核酸轉染試劑通常包括載體、輔助劑和緩沖液等成分。其中，載體是用于將DNA或RNA包裹起來并保護其免受降解的物質。輔助劑則可以幫助載體進入細胞內部，并促進其與細胞膜的結合。緩沖液則用于調節pH值和離子濃度，以維持細胞的正常生理狀態。在進行核酸...
8-15
在現代生命科學領域中，基因干擾技術已經成為了一種重要的分子生物學工具，它通過特定的方法抑制或調節基因的表達，為研究基因功能、治療疾病以及生物技術應用提供了新的可能性。基因干擾的核心機制是RNA干擾(RNAi)。這種現象在植物和線蟲中發現，后...
7-17
基因過表達是現代分子生物學研究中的一項重要技術，它涉及將特定基因在目標生物體內高水平表達，以便研究該基因的功能和調控機制，或用于生產大量的蛋白質等。基因過表達通常涉及以下幾個關鍵步驟：選擇目標基因并復制其DNA序列；其次，將這段基因序列插入...
3-18
慢病毒包裝細胞系是一種理想的工具，可用于實現有效的基因傳遞和表達，具有廣泛的應用前景。隨著慢病毒包裝技術的廣泛應用，選擇適合自己研究需要的細胞系變得至關重要。是用于生產慢病毒載體的特殊細胞系。慢病毒是一類能夠穩定整合到宿主基因組中的病毒，可...
2-1
慢病毒濃縮試劑的原理基于離心濃縮、凍融循環和沉淀洗滌的方法。首先，將含有慢病毒的培養液通過離心操作進行初步濃縮，去除大部分細胞殘渣和雜質。接下來，將濃縮后的慢病毒溶液凍結，并迅速解凍，形成凍融循環。這個過程會導致慢病毒表面的脂質包膜破裂，釋...
1-4
穩定細胞株是指具有長時間傳代穩定轉基因表達的細胞系，其原理主要包括兩個方面：轉染外源DNA和篩選穩定轉染細胞。穩定細胞株的建立需要將外源DNA轉染到目標細胞中。目前常用的轉染方法有瞬時轉染和穩定轉染兩種。瞬時轉染主要通過電轉、化學轉染或病毒...
